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提取RNA细胞系和细菌



  1. #1
    Stonekiller.

    提取RNA细胞系和细菌


    ------

    Bonjour à tous,
    我想利用以下情况下的mRNA提取的知识螺钉:我将在细胞(HT-29)上生长细菌(HT-29)。在动力学结束时,我希望能够孤立细菌RNA以及真核RNA。我看着做什么,通常,它是一种经典的RNA提取,包括两个RNA。我还注意到,还可以通过列系统消除90%的真核RNA,但我承认我害怕价格(我错了。无论如何,谁似乎最好:
    _Travel在RNA混合(巨大的背景噪音?)或
    _travel在两个单独的RNA上(损失成绩量?)


    谢谢你的帮助

    -----

  2. 宣传
  3. #2
    piwi.

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    我会在这里说一笑,但将细胞放在悬架中并在网状单位上过滤它们而不是太大(<5-10μm),是否没有办法将细菌与细胞分离以便分别从两种群体中提取RNA?

    Cordialement,
    piwi
    我为科学服务,这是我的快乐......似乎。

  4. #3
    弗兰基努

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    即使我没有看到在细胞上培养细胞的兴趣,如果你想明确将MRNA分开,为什么不尝试离心。然后你提取了两个或两个阶段中的一个,你提取了....
    在这个悬挂中,我可以是一个简单的观点,但我看不出为什么它不会工作......细菌小于人类细胞

  5. #4
    Stonekiller.

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    我想到了它,但我害怕在攻击提取之前损坏细胞。

  6. 在futura上看视频
  7. #5
    Stonekiller.

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    是的,我也想到了离心,但在细胞的情况下,我不知道器官学家是否会撒谎并且RNA降解。
    PS:这种操纵的目的是看到通信细胞/细菌

  8. #6
    piwi.

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    不要担心你的细胞。您不会以100,000 rpm离心。另一方面,我不知道是否易于在细菌和低速细胞之间制作差分中心(<10,000 rpm)。这就是为什么我建议过滤器。

    Cordialement,
    piwi
    我为科学服务,这是我的快乐......似乎。

  9. 宣传
  10. #7
    弗兰基努

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    我在HCT-8上做细胞文化,如果我没有误解HT-29S是一个相对较轻的家伙。在胰蛋白酶的1小时和离心机的小圈后,HCT-8抗拒很多东西和重新开发。但在我看来,如果你不想遵循列上的技术,我们将不得不谈到一点才能找到一个适合你的技术......更多这是什么是有趣的?! P.

  11. #8
    Stonekiller.

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    呵呵,我不知道我是否会去到目前为止,但它是它带来胡椒!我将通过离心测试方法,我将计算上清液的细菌,这将让我了解我的失败。感谢您的意见

  12. #9
    卡莫尔

    Re:提取RNA细胞衬里和细菌

    它也取决于你想做的rnas。 RT-PCR在Taqman,如果您的引物和探针做得好,通常没有问题。
    如果您想制作更少的特定技术,实际上它可以提出问题。
    通过测量16S和18S的量,另一种方法是定量电泳凝胶,但您的数字将不记录

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