讨论
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故事核酸酶



  1. #1
    aminabio.

    Tale nuclease


    ------

    您好,我想知道是否有人会听说过关于缩略图的那些人工酶,导致DNA双链断裂,我想知道是否将它们用真核细胞中的质粒转发,因此需要该基因。与之融合真核细胞的DNA或简单的过渡表达足够,非常感谢BCP

    -----

  2. 宣传
  3. #2
    地狱般

    Re : Tale nuclease

    Bonjour,

    通常,与核酸酶锌手指一样,它们注射在形式的RNA中......我没有看到将该系统整合到基因组中是如何有用的。这只是一个定向诱变。所以在我的团队中,它们在斑马鱼中使用。将mRNA的扭矩注入细胞阶段,希望诱变在胚芽线中有效以传递该突变并产生突变的兴趣基因的下降。
    我想象在细胞培养方面显着相同。也就是说,过渡表达应该足够......它只是通过MRNA更快,只有翻译在具有功能工具之前将作为一步交叉。

  4. #3
    aminabio.

    Re : Tale nuclease

    好的,谢谢BCP为您的答案,但用于使用MRNA:而质粒应该构成
    PSK直到您听说过它,我提出了我的协议,有必要使缩略图构建的逆转录部分得到相应的cDNA并向克隆能力进行动力,然后将它们转染到细胞真核细胞中?

  5. #4
    地狱般

    Re : Tale nuclease

    但为什么要进行相反的转录(RT)Talens?
    通常,它们以载体的形式提供。没有理由使分子工具的RT!
    但是你的Talens夫妇是什么形式的地方?你没有两粒质粒?

  6. 在futura上看视频
  7. #5
    aminabio.

    Re : Tale nuclease

    bonjour,
    是的,我们有两种已经准备好的质粒,其实我正在实习,我们要求实现使用故事的人体细胞中的特定基因失活的实验方案。并认为我从未使用过这种技术甚至在进步中看到我并不真正知道如何为我做:
    认为质粒已准备好:
    克隆在细菌中
    在感兴趣的细胞中转染
    并通过PCR和测序验证验证
    这是大线,但我不确定我

  8. #6
    aminabio.

    Re : Tale nuclease

    请,C一点紧急,因为我今晚要做我的协议,谢谢

  9. 宣传
  10. #7
    地狱般

    Re : Tale nuclease

    啊......对不起,我也是一名学生,事实上,在当天我在大学。
    我提醒你,我从未在过渡表达的背景下尝试,也没有关于细胞文化。
    OK进行转染,但相对于PCR检查,您将如何进行?转染后你会恢复DNA多久?
    此外...在实验室中,我们使用几只额外的缩略语作为对工具的积极控制,针对我们知道诱变的基因,我们知道诱变效果很好。

  11. #8
    aminabio.

    Re : Tale nuclease

    我问并以质粒的形式问过泰勒的声音准备使用帆船我提出的计划:
    - 转染48小时的兴趣和temoin细胞的利益(我已经用瓦斯拿着载体),但对于你的vs已经说过,我们知道它很好地井(我理解Poen是什么有用的)
    - 利用核酸酶T7的兴趣和消化的利益和对琼脂糖基因的兴趣来提取DNA,然后与琼脂糖基因的迁移,并与证人的比较(在没有利息的行动的情况下消化利益的消化产品。 Talens)
    我不知道它是否好?

在他们ême sujet


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